药物合成中常用的肼：肼、酰肼化合物（如乙酰肼）、脂肪族肼类（1,1-二甲基肼、1,1,1-三甲基肼溴化物）、苯肼等。

　　针对保留较强的肼可以采用直接测定法，包括LC-SRM-MS/MS、IEC、HILIC、电化学检测器或安培检测器检测。而对于大部分保留较弱的肼类多需要衍生化方法。

　　1、衍生化-TLC法（欧洲药典、美国药典方法）

　　对象：卡比多巴、共聚维酮、聚维酮、盐酸肼屈嗪、异烟肼等多种药物及药用辅料中的残留的肼。

　　原理：水杨醛作为衍生化试剂，经LLE处理，应用硅烷化硅胶RP2 TLC板，甲醇：水（2：1）为展开剂，365nm作为检测波长。

　　灵敏度：1-20 ppm。

　　2、衍生化-HPLC-UV法（欧洲药典、美国药典方法）

　　对象：别嘌呤醇；盐酸肼屈嗪；苯肼哒嗪中的残留肼。

　　原理：均以苯甲醛作为衍生化试剂，检测波长分别为310 nm和305 nm。

　　灵敏度：10 ppm。

　　3、衍生化LC-UV法测定苯肼

　　对象：塞来昔布和安替比林中的残留苯肼。

　　原理：苯肼与对硝基苯肼室温反应生成强紫外吸收的衍生化产物。

　　4、衍生化LC-MS法

　　对象：药物中痕量肼和乙酰肼的同时定量测定。

　　原理：以苯甲醛作为衍生化试剂；色谱柱为Phenomenex Luna C18(2)柱；流动相为0.1%甲酸水-0.1%甲酸乙腈。

　　灵敏度：10 ppm。