对药物中各种来源的杂质的控制是保证药品用药安全的重要环节，对发酵来源药物中各类外源性残留物的分析是药物杂质控制的难点。来自发酵菌株宿主细胞残留DNA，特别是传代细胞系的DNA具有潜在致瘤和传染风险，该类大分子物质还会引起诸多过敏性不良反应。因此，发酵来源的药品中宿主细胞残留的DNA是影响用药安全的潜在危险因素，对此类残留物的控制一直是欧美发达国家关注的重点。

　　对于残留DNA的检测，根据前处理方式的不同可分为溶液直接测定和DNA提取2种。溶液直接测定方式没有样品前处理，为DNA“原位”测定；而采用DNA提取的前处理方式如磁珠法等，可对样品残存的微量宿主DNA有效提取，提高了检测灵敏度和准确性。

　　目前，各国药典收载的DNA检测方法主要有4种，依据检测原理和特点的不同各有其优缺点。但无论哪种检测方式和检测手段，选择适宜的溶剂均是实现准确测定的关键。一般来说，发酵来源的生物类产品多为水溶性，其供试品溶液的配制可直接采用水或三羟甲基氨基甲烷-乙二胺四乙酸（Tris-EDTA，TE）缓冲液，这些溶剂对DNA有良好的溶解性和稳定性。但对于发酵类脂溶性药物，由于几乎不溶于水，往往需要采用极性较弱的有机溶剂先进行溶解后再进行残留DNA测定。

　　已有研究结果表明，有机溶剂会改变DNA空间构象而导致DNA发生变性或沉淀，这可能会影响残留DNA的准确测定。因此，对于发酵类脂溶性药物来说，合理选择溶剂是实现残留DNA准确测定的关键因素。有必要对发酵类脂溶性药物中残留DNA检测所用的溶剂进行合理考察和筛选。

　　环孢素（cyclosporine，又名环孢素A或环孢菌素）是20世纪70年代于真菌多孔木霉（Tolypocladiuminflatum）培养液中分离得到的一种亲脂性环状多肽类化合物，具有抗真菌、抗寄生物、消炎等广谱药理活性，20世纪80年代作为免疫抑制剂开始在世界范围内被广泛应用，现用于多种组织、器官移植预防排斥反应和免疫性疾病的治疗。

　　两性霉素B（amphotericin B）是一种由结节性链丝菌（Streptomyces nodosus）发酵得到的一种大环多烯类抗生素，用于深部真菌感染。环孢素几乎不溶于水，易溶于甲醇、乙醇、乙腈、乙酸乙酯或丙酮等有机溶剂；两性霉素B在水中不溶，在N，N-二甲基甲酰胺（DMF）中溶解［19］，两者均是典型的发酵来源脂溶性抗生素药物。

　　根据相关法规要求，目前我国此类原料在出口欧盟时，需企业提供相关残留DNA的检测数据，用以证明产品的安全性和批间工艺的稳定性。目前，外源性DNA残留量测定是医药生物技术产品安全性评价的一个重要项目，《中华人民共和国药典》（以下简称《中国药典》）2015年版三部收录及文献报道的检测样品多为疫苗、重组产品和生化药品等水溶性样品，溶剂有注射用水、生理盐水或葡萄糖注射液等。但这些溶剂以及TE缓冲液等均无法应用于脂溶性药物供试品溶液的配制和残留DNA测定。

　　本研究以脂溶性药物-环孢素为例，依据经典荧光染色法的检测原理，采用简便、快速的Qubit®双链DNA检测试剂盒对供试品溶液直接分析，按照残留DNA检测的一般步骤和关键点，对发酵类脂溶性药物残留DNA检测中溶剂的考察与选择进行了深入的元素杂质研究。

　　还应用筛选的溶剂对另一种脂溶性药物——两性霉素B中残留DNA进行了测定，进一步验证了方法的准确性和可靠性。本文筛选得到的溶剂既可较好溶解检测样品，又不会对DNA稳定性产生影响，有助于脂溶性药物中残留DNA的准确测定。