生物相容性试验要求和试验方法的准备实例

　　为规范GB/T 16886系列等生物相容性评价标准的实施，便于注册产品标准相关章节的编写，我院生物相容性实验室编写了部分生物相容性试验项目和试验方法示例，供相关人员参考。

　　生物相容性测试要求

　　常见测试项目:

　　1.细胞毒性:

　　相对细胞增殖率应不低于70%。(当采用GB/T16886.5-2017中的MTT法时)

　　细胞毒性不应大于x级(琼脂扩散法等的要求。，以及对企业根据自身产品性质和风险确定等级的要求)

　　2.皮内反应性:供试品和溶剂对照的综合平均分之差应不大于1.0。

　　3.迟发型超敏反应:不应有迟发型超敏反应。

　　其他测试项目

　　测试分类:

　　4.原发性皮肤刺激:原发性皮肤刺激指数应不超过0.4。

　　5.阴道刺激:刺激指数应不大于4(极轻)/8(轻度)。(企业根据自身产品的性质和风险要求)

　　6.口腔黏膜刺激:刺激指数应不大于4(极轻)/8(轻度)。(企业根据自身产品的性质和风险要求)

　　7.眼睛刺激:测试样品不会引起眼睛刺激。

　　全身毒性试验的分类:

　　8.急性全身毒性:不应有急性全身毒性。

　　9.亚急性全身毒性:不应有亚急性全身毒性。

　　10.亚慢性全身毒性:应该没有亚慢性全身毒性。

　　11.热原:供试品应无热原反应。

　　遗传毒性测试:

　　2.鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验(Ames试验):突变应为阴性。

　　3.小鼠淋巴瘤细胞基因突变试验:突变应为阴性。

　　14.染色体畸变试验:突变应为阴性。

　　15.植入试验:与对照样品相比，应不引起组织学反应或仅有轻微组织学反应。(注:植入部位和周期应在植入试验中说明，如12周肌肉植入试验)

　　生物相容性测试方法:

　　原理:主要明确提取介质、提取比例、提取温度、提取时间和方法。

　　1.细胞毒性:以完全细胞培养基为提取介质，按0.2g/mL的比例在(37±1)℃

　　注:提取比例应由企业根据样品的特性和GB/T 16886.12中的相应条件选择；同时根据选定的细胞毒性试验方法(如MTT、琼脂扩散、直接接触等。)，在方法中有说明。

　　2.皮内反应性:分别以生理盐水和植物油为提取介质，按0.2g/mL的比例，在(37±1)℃

　　注:若选择原发性皮肤刺激、阴道刺激、口腔粘膜刺激和眼睛刺激，请在标准相应位置更换皮内反应性方法；同时联系工程师确定所用浸出介质的种类，或者是否直接取被测样品作为测试对象。

　　3.迟发型超敏反应:分别以生理盐水和植物油为提取介质，按0.2g/mL的比例，在(37±1)℃

　　注:英格尔医药企业根据受检样品的性质，选择最大剂量法或贴片法。

　　4.急性全身毒性:以生理盐水和植物油为提取介质，以0.2g/mL的比例在(37±1)℃

　　注:企业根据产品的给药途径，选择相应的给药途径，如口服途径，并在相应位置更换。

　　5.亚急性全身毒性:以生理盐水为提取介质，按0.2g/mL的比例在(37±1)℃

　　6.亚慢性全身毒性:以生理盐水为提取介质，在(37±1)℃

　　注意:给药途径(静脉注射或口服)应根据产品特点和应用方式选择。

　　7.热原:以生理盐水为提取介质，按0.2g/mL的比例在(37±1)℃提取(72±2)h，按中国药典规定的方法检测，结果应符合X.X的要求

　　8.鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验(Ames试验):分别以生理盐水和DMSO为提取介质，在(37±1)℃

　　9.小鼠淋巴瘤基因突变试验:分别以生理盐水和DMSO为提取介质，比例为0.2g/mL，在(37±1)℃

　　10.染色体畸变试验:分别以生理盐水和DMSO为提取介质，比例为0.2g/mL，在(37±1)℃

　　1.植入试验:将样品制成合适大小的试验对象，以皮下/肌肉/骨骼方式植入实验动物相应部位，植入周期为x周。按照GB/T 16886.6-2015中规定的相应方法进行试验，结果应符合X.X的要求。