基因毒性杂质危害性大，需要严格控制其在药物中的限度，保障用药安全。基因毒性杂质的检测面临杂质种类多和化学性质活泼等问题，分析方法复杂多样，从而对药物中基因毒性杂质的检测方法提出了很高的要求。

　　影响药品纯度的物质被称为杂质，药品中的杂质一般没有治疗作用，有的会影响药物的稳定性和疗效，甚至导致不良用药事件的发生。

　　药物中杂质来源主要有两方面:

　　①在药物的生产过程中引入。

　　②由储藏或运输过程中受到外界条件的影响，导致药物理化特性发生变化而产生。

　　Ashby等在研究了300多种化合物对DNA活性影响研究的基础上，首次提出了基因毒性的概念。

　　基因毒性杂质(genotoxic impurity，GTI)定义为“经过适当遗传毒性实验模型，如细菌基因突变(Ames)实验，证实具有遗传毒性的杂质”。

　　该类杂质可能从基因突变、染色体畸变、DNA损伤与修复等几个方面同DNA发生直接或间接的相互作用，从而改变DNA结构与构象或引起DNA的损伤，进而影响DNA的功能或改变其遗传特性，最终引起突变、癌变、畸变等遗传毒性。

　　关于药物中基因毒性杂质超标导致药品召回的事件均有报道，各国药品监督管理部门对药物中基因毒性杂质的控制出台了一系列的指导文件，旨在严格控制该类杂质在药物中的限度。

　　基因毒性杂质的研究思路

　　将药物中的基因毒性杂质完全除去实际操作难度很大，ICH，EMA和FDA均颁布了相关的基因毒性杂质控制指导文件，推荐以毒理学关注阈值(threshold of toxicological concern，TTC，1.5μg·d-1)来控制用药风险。

　　基因毒性杂质的来源

　　药物中基因毒性杂质的来源有原料药合成的起始物料、反应中间体、催化剂和试剂等。

　　此外，在药物的合成、制剂生产、储存或运输过程中也会生成基因毒性杂质，所以药物中基因毒性杂质的来源贯穿药品的生产和流通整个过程。

　　基因毒性杂质的分类

　　为确定某种物质是否具有基因毒性，目前主要通过毒理学评估手段，以体外Ames实验为主，辅以部分体内实验进行补充。

　　自然界中化合物的种类成千上万，对药物合成过程中所涉及的化合物均进行毒理学评价，判别它们是否为基因毒性杂质的方法成本高、周期长，在实际研究工作中难以开展。

　　通过化学物质的结构与毒理学活性相关方面的研究，某些官能团或者亚结构单元，能与生物体内一些功能性的大分子发生反应，引起基因突变，这些官能团或者亚结构单元对生物活性具有警示作用，统称为“警示结构”。

　　基因毒性杂质的限度

　　2004年EMA发布的基因毒性杂质限度指南(草案)，采用“最低合理可行”的概念，默许全面消除风险是无法实现的，因此建议采用毒理学关注阈值TTC作为基因毒性杂质的可接受限度。

　　TTC概念的应用允许在无任何体内数据时，在足够的安全性基础上建立杂质控制限度。

　　TTC的应用有利于企业和监管机构，使其避免做不必要的毒理学研究和安全性评估。

　　然而，该草案没有明确短期临床试验的允许限度，在某些短期临床研究中，也被迫接受TTC的终生暴露限值。

　　基因毒性杂质的检测方法

　　基因毒性杂质的化学结构种类繁多，如何针对特定的基因毒性杂质选择最合适的分析方法是药物中基因毒性杂质研究的重点和难点。

　　基因毒性杂质的研究难点和问题

　　针对基因毒性杂质限度低、结构多样、化学性质活泼等特点，研究面临诸多难点，主要表现在如下几个方面。

　　①基因毒性杂质的种类多，理化性质差异大。针对某一个药物中基因毒性杂质的检测可能需要开发多个研究方法，各方法的研究结果相互补充，以满足测定要求。

　　②基因毒性杂质的稳定性差的问题。基因毒性杂质多含有活泼的官能团，易和介质等发生反应或自身容易发生氧化、还原或分解反应等，在样品分析过程中可能需要加入稳定剂或者衍生化解决稳定性的问题。

　　③基因毒性杂质的限度较低。在检测中通常会配制高浓度的供试品，以达到设定的检测限。

　　在液质方法检测中，高浓度的供试品可能析出、堵塞色谱柱、污染离子源、基质效应以及干扰待测物出峰等问题，增加检测的难度。在实际研究中可以改变溶剂组分让供试品析出或SPE等其他方法，将高浓度的基质除去。

　　药物中基因毒性杂质由于限度要求低和化学性质活泼等原因，使得测定方法要有较高的灵敏度，一般将衍生化或SPE等样品处理方法同液质和气质检测仪器结合起来。

　　药物中基因毒性杂质的限度检查研究关注药物中痕量的毒性杂质，拓宽了药物的质量控制范围，为药物的临床应用安全性提供保障。