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细胞毒性试验
来源:英格尔医药 发布时间:2022-11-16
什么是细胞毒性试验?
该测试测试仪器对哺乳动物细胞的毒性。
通用性:广泛用于各种医疗和材料评价。
检测方法
1.浸出液法
2.间接接触法
3.直接接触法
测试标准
通用测试标准:
1.医疗器械生物学评价第5部分:体外细胞毒性试验ISO 10993-5/GB/T 16886.5
2.医用输液、输血和注射器械试验方法第2部分:生物试验方法GB/T 14233.2
3.医用硅酮材料生物学评价试验方法GB/T 16175
测试步骤
1.测试样品和对照样品的制备
2.细胞培养的制备
3.加入样品并培养24小时。
4.加入MTT并测试吸光度值。
结果判断
细胞毒性测定
1.定性评价法:评价一般形态、空泡形成、脱落、细胞溶解和膜完整性的变化。
2.定量评估方法:测量细胞死亡、细胞生长抑制、细胞繁殖或细胞克隆形成;评估细胞数量、蛋白质总量、酶的释放、活性染料的释放和减少。
细胞毒性的主流测试方法
MTT(噻唑蓝)比色法:细胞活力-总细胞中活细胞的百分比,定量方法。
活细胞可以将MTT还原为甲,甲是一种不溶于水的蓝紫色产物,而死细胞则没有这种功能。
DMSO溶解细胞中沉积的蓝紫色晶体,溶液的颜色与所含的甲的量成正比。
用酶标仪测量溶液在570nm处的吸光度:浓度越大,吸光度越大。