虽然各国药典都规定了药品的微生物检验方法，但不同的供试品、不同的仪器或材料、实验环境条件都可能影响检验结果。

　　例如，当被检产品具有抑菌性时，会掩盖无菌药品已被污染的事实或造成细菌检验结果低于实际污染水平；如果选择了不合适的培养基，其促进细菌生长的能力不符合要求，也会造成类似的后果。此外，为了保证用药安全，有些药物还添加了一定的防腐剂。当防腐剂性能受到质疑时，微生物的类型、生长状态、培养基的pH值和其他因素都会影响测试结果。

　　为了使微生物检验方法的结果准确可靠，有必要对每个品种的具体检验方法进行验证。

　　本文重点介绍了药品的微生物学方法验证，包括:微生物限度检查法、无菌检查法和防腐剂抗菌效力的测定方法。类似于化学检验方法的验证原理，在对特殊品种应用药典微生物学方法时，需要对方法进行研究，找出微生物学检验方法的适用条件，即通过实验寻找并确定合适的材料、条件和方法。在此工作的基础上，通过验证试验，最终确认检验条件并批准为正式方法。

　　一、微生物检验的影响因素

　　在药品的微生物检验中，无论是微生物限度检查、无菌检查，还是药物防腐剂的抗菌效力检查，其检验结果都受到多种因素的影响，其中抗菌因素因其特殊的重要性而受到关注。在药品检验实践中，以下因素会影响微生物检验。

　　①药物本身的抑菌作用。

　　②药物中防腐剂的抑菌作用。

　　③培养基的促生长能力。

　　④培养条件(温度、湿度、有氧或无氧)。

　　⑤过滤系统的材料。

　　此外，检验中使用的微生物种类和生长状态也会影响微生物的检验结果。

　　众所周知，一些无菌药品中常添加抗菌药物，如多剂量注射剂。眼药水中常添加抗菌剂，以确保可以安全使用一段时间。抑菌剂的有效性应通过微生物挑战试验来确认。挑战微生物菌株的制备方法影响抗菌产品的检验。因为激发试验中使用的微生物的生长和制备方法决定了细胞的生理状态，而这种状态直接影响抑菌功效测定的结果。

　　美国药典明确规定了抑菌剂抑菌效果的检验。测定中使用的微生物包括革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、酵母菌和霉菌等。本节末尾列出了美国药典和欧洲药典药品微生物学检验和验证中常用的细菌名称和代号。

　　微生物培养条件是影响样品中细菌计数准确性的重要因素。要注意影响结果的两个方面:一是培养基本身的性质；第二是培养条件。一般来说，培养基应具有广谱性，即有利于样品中所有活微生物的生长。此外，应注意最佳培养条件，以确保微生物的充分生长和计数结果的良好重现性。